一、酵母蛋白表达服务简介
酵母表达系统,是工业微生物中应用较广泛的系统,遗传和生理背景清楚而且安全,结合了原核和高等真核表达系统的优点:生长快、培养成本低廉、操作简单并且蛋白翻译后能进行正确加工、修饰和折香、表达的重组蛋白更加稳定、适于表达真核生物基因和制备有功能的蛋白质。
二、武汉科斯坦生物优势
1.表达宿主包括酿酒酵母和毕赤酵母,蛋白表达成功率高o
2.可提供多种酵母表达载体:有适用于分泌表达及胞内表达的营养缺陷型表达载体;有可以直接转化野生型毕赤酵母并且高效筛选表达菌株的载体等。
3.丰富的酵母表达经验:可根据客户需求选择合适的载体,为客户进行整个表达体系的条件摸索及优化。
4.高通量的酵母转化筛选平台,丰富的酵母蛋白表达经验:很多原核表达的分泌型蛋白会出现不溶或包涵体无活性情况,选择酵母表达系统则可避免这些问题,成功表达蛋白。
5大规模生产:可满足每批次1-4000L的生产规模。
6.一站式服务:基因设计及优化、蛋白表达条件优化、组成型表达菌株构建、蛋白纯化及后续加工处理、数据及报告整理。
三、服务内容
服务名称 | 服务内容 | 服务周期 | |
表达体系选择 | 表达载体:pPIC9k、 pPIC3.5、 pPICZQA、 pA0815、 pGAP a、pYES2/NTA 表达菌株:GS115、KM71、X33、INVSC1 |
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表达载体构建 | 基因优化及设计,合成基因及亚克隆 | 2-4周 | |
表达及纯化测试 | 质粒线性化、转化、抗性平板筛选、PCR鉴定或梯度加压 筛选、表达分析鉴定SDS-PAGE and/or WB)、最优条 件100mL扩大及纯化测试、标签去除测试(可选) | 3-6周 | |
1-10L表达及纯化 | 蛋白亲和纯化(或其他纯化方式)、蛋白buffer置换浓 缩、SDS-PAGE/WB鉴定纯化后蛋白、MS鉴定(可选)包 涵体变复性(可选)、标签去除(可选) | 2-3周 | |
大规模发酵与纯化 | 蛋白亲和纯化(或其他纯化方式)、蛋白Buffer置换浓 缩、SDS-PAGE/WB鉴定纯化后蛋白、MS鉴定(可选) | 10-20L | 3-4周 |
20-50L | 4-5周 | ||
50L以上 | 6-12周 |
四、服务套餐
基础套餐CS-1031:
针对一个质粒构建,测试20个阳性克隆,最佳克隆进行纯化测试。
增强套餐CS-1032:
针对一个质粒构建,测试20个阳性克隆后,挑选最佳2株克隆进行表达条件优化,最佳克隆及最佳表达条件进行纯化测试。
加压套餐CS-1033:
针对一个质粒构建,转化后抗生素加压筛选,挑选10株克隆进行表达条测试,挑选最佳2株克隆进行表达条件优化,最佳克隆及最佳表达条件进行纯化测试。
五、表达案例
六、咨询与订购
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