辅助试剂、试剂盒_武汉科斯坦生物科技有限公司

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产品介绍

本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA 的硅基质材料和独特的缓冲液系统，从TAE 或TBE 琼脂糖凝胶上回收100bp-30kbDNA 片段，有机化合回收率高达80%，每个离心吸附柱每次可吸附的DNA 量为10 μg同时除去蛋白质、其它杂物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。

产品特点

快速：整个操作过程快速方便，十几分钟即可完成回收工作。

多样：可以回收单链、双链DNA 片段以及环状质粒DNA。

高效：可以高效回收目的DNA。

内装

所有溶液应该是澄清的，如果环境温度低溶液静置时间久，可能会有沉淀形成，属于正常现象，使用前可在37℃水浴中温浴5-10分钟。

操作步骤

1在紫外灯下，用干净刀片将所需回收的DNA条带切下，尽量切除多余部分，得到的凝胶体积越小越好。

注意:电泳时最好选用新的TAE电泳缓冲液;紫外灯下切胶时间不宜过长。

2.将切下的含有DNA条带的凝胶放入15ml离心管中，加入750ulMTB溶液，55℃水浴或金属浴放置10-15分钟，每隔5分钟上下颠倒数次，以确保胶块充分溶解。

注意:如果胶块体积过大，可将胶块切碎;溶胶后，若溶液的颜色变为桔红色或紫色，应加入5-10ulNB溶液，使其变回淡黄色;对于回收的DNA片段<500bp时，待胶块完全溶解，可加入同等胶块体积的异丙醇，上下颠倒混匀后再过吸附柱，有利于提高DNA回收率。

3.将上一步所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中，室温12000rpm离心1分钟，弃掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

注意:吸附柱容积为800ul，溶胶后溶液体积大于800ul可分两次加入。

4.向吸附柱中加入500ulCB溶液(使用前加入无水乙醇)，室温12000rpm离心1分钟，弃掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

注意:如果纯化的DNA用于盐敏感的实验，建议加入CB溶液后静置2分钟再离心。

5.重复步骤4一次。

注意:此步骤目的是洗去吸附柱上的盐和其他离子，不应省略。

6室温12000rpm离心2分钟，彻底去除吸附柱中的漂洗液，丢弃收集管，将吸附柱置于一个新的离心管中。

7开盖室温静置5分钟，向吸附柱中间部位的吸附膜滴加15-25ulEB溶液。

8.扣盖室温静置5分钟，室温12000rpm离心2分钟，将DNA溶液收集至离心管中。

注意:可将收集的DNA溶液再次加入至吸附柱中离心，也可将EB溶液温浴至70℃后再进行洗脱，以提高DNA的回收率;洗脱液的pH值会影响洗脱效率，若用ddH₂O洗脱，应确保其pH值在7.0-8.5范围内。

DNA的检测

实验室常用1%琼脂糖凝胶电泳检测回收的DNA片段纯度。测DNA浓度时，OD/OD比值应在1.7-19范围内，1.8为最佳。

Note

For research use only .