一、昆虫蛋白表达服务简介
杆状病毒-昆虫表达系统,凭借其易于筛选、具有翻译后修饰功能及高表达水平的优势,成为当今应用较广泛的真核表达系统之一武汉科斯坦生物的杆状病毒-昆虫蛋白表达服务,采用经典的Bac-to-Bac表达体系,并加以改进。在表达方式(胞内或分泌),信号肽选择,细胞培养方式及细胞选择(Sf9Sf21Hi-5)方面有着丰富的案例经验。可为国内外药企,高校及科研客户提供高达200L的蛋白表达纯化服务。
二、武汉科斯坦生物优势
1高成功率:科斯坦生物杆状病毒-昆虫表达系统蛋白表达目前还没有失败案例。
2成熟的设计方案及条件筛选体系:根据蛋白性质选择胞内表达或分泌表达,针对分泌表达可为客户选择高效分泌信号肽。表达细胞:Sf9、Sf21Hi-5,通过测试不同时间的MOI,摸索最佳表达条件以达到最优表达量。
3大规模生产:可同时进行200L体系的表达及纯化。
4一站式服务:基因设计及优化病毒生产、蛋白表达条件优化、蛋白纯化及后续加工处理、数据及报告整理。
二、服务内容
服务名称 | 服务内容 | 服务周期 | |
表达体系选择 | 表达载体:常规商业化载体系列、经武汉科斯坦改造后的表达载体 表达细胞:Sf9 Sf21 Hi-5 |
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表达载体构建 | 基因优化及设计、基因合成及亚克隆 | 2-4周 | |
表达及纯化测试 | 转化及Bacmid鉴定、P1代病毒生产及表达测 试(SDS-PAGE and/or WB)、P2代病毒生 产及MOI测试(SDS-PAGE and/or WB)、最 优条件200m1扩大及纯化测试、标签去除测试 (可选) | 3-5周 | |
1-10L表达及纯化 | 蛋白亲和纯化(或其他纯化方式)、蛋白 buffer置换浓缩、SDS-PAGE/WB鉴定纯化 后蛋白、MS鉴定(可选)、标签去除(可 选) | 1-3周 | |
大规模发酵与纯化 | 蛋白亲和纯化(或其他纯化方式)、蛋白 buffer置换浓缩、SDS-PAGE/WB鉴定纯化 后蛋白、MS鉴定(可选) | 10-20L | 2-4周 |
20-50L | 3-6周 | ||
50L 以上 | 4-12周 |
三、表达案例
昆虫蛋白表达服务订单,包含1L表达及纯化。由于表达量达到了368mg/L(纯化后),纯化测试即可获得足量的蛋白。经客户验证,证明其活性良好,我们即刻交付约60mg蛋白,该订单在纯化测试阶段结束。1L放大及纯化费用退还予客户。
四、咨询与订购
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