重组T4 RNA连接酶2来源于T4噬菌体，采用E.coli重组表达，是一种ATP依赖的双链RNA连接酶，可以用于双链RNA进行分子内的环化连接和分子间的线性连接。与T4 RNA 链接酶1不同的是，重组T4 RNA连接酶2对双链RNA中的缺刻(nick)的连接活性要大大高于对单链RNA末端的连接活性。重组T4 RNA连接酶2也可用于双链核酸(RNA双链、RNA/DNA杂合链和/或DNA双链)分子内或分子间RNA链的3'羟基和DNA链的5'磷酸基的连接。重组T4 RNA连接酶2连接时需要5'磷酸和3'羟基的存在，可以是RNA链或DNA链的5'磷酸基和RNA链的3'羟基之间发生连接反应。